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深圳市興德威電子科技有限公司

重慶血清兼容PEI轉(zhuǎn)染試劑

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對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的檢測(cè),保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過(guò)程中有很多實(shí)驗(yàn)室因素(配置方法,PH,水純度,稱量的準(zhǔn)度,dnaRNA純度,細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問(wèn)題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,針對(duì)極個(gè)別客戶溶解問(wèn)題和轉(zhuǎn)染效率問(wèn)題我們能友善解決。PEI轉(zhuǎn)染試劑對(duì)復(fù)合物孵化的時(shí)間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。重慶血清兼容PEI轉(zhuǎn)染試劑

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注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量:請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒(méi)有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!廣東PEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí),一般和DNA的比例是多少呢?

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方法:1.細(xì)胞分盤(pán):通過(guò)胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無(wú)血清培養(yǎng)基。2.制備PEI-DNA混合物:以60mm組織培養(yǎng)皿用420μL反應(yīng)總體積為例。準(zhǔn)備兩支1.5mL離心管,一管將質(zhì)粒DNA(總量2-8μg為佳)加入240μLHBS中,混勻。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲(chǔ)存液稀釋成10μM,充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中,充分混勻后室溫靜置20-30min。將這420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)基中,輕輕搖動(dòng)平皿混勻,置于含5%~7%CO2的37℃溫箱孵育。注:每次用100μM的PEI儲(chǔ)存液前都需要先將其充分混勻,保證所取的濃度一致。3.培養(yǎng)6-10h后更換為37℃預(yù)熱的含有血清的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng),16h左右可以觀測(cè)到報(bào)告基因的表達(dá)。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!

接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑,歡迎咨詢上海曼博生物!有誰(shuí)用過(guò)40K的PEI轉(zhuǎn)染試劑?

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材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長(zhǎng)的真核細(xì)胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲(chǔ)存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過(guò)濾,儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,過(guò)濾(0.2μm濾膜)后儲(chǔ)存于4℃?zhèn)溆?。方法?.細(xì)胞分盤(pán):通過(guò)胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇培養(yǎng)皿,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無(wú)血清培養(yǎng)基。如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑。無(wú)動(dòng)物源成分PEI轉(zhuǎn)染試劑中國(guó)代理權(quán)

哪個(gè)品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價(jià)比高呢?重慶血清兼容PEI轉(zhuǎn)染試劑

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。上海曼博生物是Polysciences官方授權(quán)du jia代理商,更多關(guān)于轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!重慶血清兼容PEI轉(zhuǎn)染試劑

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司位于自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)達(dá)爾文路16幢104室,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote是上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司的主營(yíng)品牌,是專業(yè)的生物醫(yī)藥科技(人體干細(xì)胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開(kāi)發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓,并提供相關(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計(jì)算機(jī)軟件的開(kāi)發(fā)、設(shè)計(jì)、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷(xiāo)售自產(chǎn)產(chǎn)品;實(shí)驗(yàn)室試劑及耗材(藥品、危險(xiǎn)品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機(jī)械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進(jìn)出口、傭金代理(拍賣(mài)除外)。【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】公司,擁有自己獨(dú)立的技術(shù)體系。公司以用心服務(wù)為重點(diǎn)價(jià)值,希望通過(guò)我們的專業(yè)水平和不懈努力,將生物醫(yī)藥科技(人體干細(xì)胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開(kāi)發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓,并提供相關(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計(jì)算機(jī)軟件的開(kāi)發(fā)、設(shè)計(jì)、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷(xiāo)售自產(chǎn)產(chǎn)品;實(shí)驗(yàn)室試劑及耗材(藥品、危險(xiǎn)品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機(jī)械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進(jìn)出口、傭金代理(拍賣(mài)除外)。【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】等業(yè)務(wù)進(jìn)行到底。自公司成立以來(lái),一直秉承“以質(zhì)量求生存,以信譽(yù)求發(fā)展”的經(jīng)營(yíng)理念,始終堅(jiān)持以客戶的需求和滿意為重點(diǎn),為客戶提供良好的血小板裂解液,WB自動(dòng)孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍(lán)牙無(wú)線標(biāo)簽機(jī),從而使公司不斷發(fā)展壯大。

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福建光刻機(jī)設(shè)備搬運(yùn)定制

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精密 等 68 人贊同該回答

精密設(shè)備搬運(yùn)是一項(xiàng)對(duì)技術(shù)要求很高的工作,必須由經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)熟練的專業(yè)團(tuán)隊(duì)來(lái)執(zhí)行。在進(jìn)行精密設(shè)備搬運(yùn)時(shí),需要確保設(shè)備的精確移動(dòng)和避免任何可能的損壞。上海照義精密設(shè)備有限公司是一家專業(yè)從事精密設(shè)備搬運(yùn)的 。

衡陽(yáng)節(jié)能燃?xì)庠钹l(xiāng)鎮(zhèn)招商
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第1樓
燃?xì)?等 56 人贊同該回答

燃?xì)庠钍乾F(xiàn)代廚房中必不可少的廚具之一,其安全、環(huán)保、高效的特點(diǎn)受到越來(lái)越多消費(fèi)者的青睞。因此,燃?xì)庠钫猩坛蔀榱吮姸嗌碳业闹匾x擇。在本文中,我們將探討燃?xì)庠钫猩痰南嚓P(guān)內(nèi)容,幫助招商者更好地了解燃?xì)庠钍?。

博山區(qū)小區(qū)園林綠化管理
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第2樓
氣溫 等 83 人贊同該回答

氣溫急驟上升,樹(shù)木生長(zhǎng)迅速。1、澆水:樹(shù)木展葉盛期,需水量很大,應(yīng)適時(shí)澆水。2、修剪:修剪殘花。行道樹(shù)進(jìn)行的剝芽修剪。3、防治病蟲(chóng)害:繼續(xù)以捕捉天牛為主。刺蛾孵化,但尚未達(dá)到危害程度,根據(jù)養(yǎng)護(hù)區(qū)內(nèi)的實(shí) 。

蘇州萬(wàn)益宏蜂巢螺旋式換熱器設(shè)備
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第3樓
螺旋 等 27 人贊同該回答

螺旋式換熱器與傳統(tǒng)換熱器相比有何優(yōu)勢(shì)?相比傳統(tǒng)換熱器,螺旋式換熱器有以下優(yōu)勢(shì):1. 更高的換熱效率:螺旋式換熱器的螺旋鼓泡,使得熱量傳遞更加充分,從而提高換熱效率。2. 更小的體積:螺旋式換熱器的緊湊 。

吉林覆蓋帶滾柱型線性導(dǎo)軌的額定負(fù)荷
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第4樓
直線 等 48 人贊同該回答

直線導(dǎo)軌使用過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題和解決方法:直線導(dǎo)軌使用過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題和解決方法1.問(wèn):為什么滑塊使用一段時(shí)間后會(huì)有珠溝剝落的情形呢?答:鐵屑從珠溝剝落導(dǎo)致鋼珠受損壽命終了,使鐵件表面有疲勞與附載過(guò)重的 。

湖南大電流交流高壓真空接觸器銷(xiāo)售公司
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第5樓
高壓 等 72 人贊同該回答

高壓真空接觸器,該系列真空接觸器包含3.6KV、7.2Kv、12Kv、24Kv、35Kv電壓等級(jí)的產(chǎn)品。極數(shù)有單極、兩極、三極、四極、五極、六極。有戶內(nèi)和戶外兩種接觸器,操作機(jī)構(gòu)有電保持型,永磁型和機(jī) 。

遼寧去離子水設(shè)備
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第6樓
反滲 等 85 人贊同該回答

反滲透設(shè)備原理和功能:⒈原理及功能:反滲透設(shè)備是將原水經(jīng)過(guò)精細(xì)過(guò)濾器、顆?;钚蕴歼^(guò)濾器、壓縮活性碳過(guò)濾器等,再通過(guò)泵加壓,利用孔徑為1/10000μm相當(dāng)于大腸桿菌大小的1/6000,病毒的1/300 。

江蘇抗震支架哪家好
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第7樓
采購(gòu) 等 46 人贊同該回答

采購(gòu)抗震支架時(shí)需要注意什么?抗震支架能夠加固排水、消防、供暖、通風(fēng)、空調(diào)、燃?xì)狻崃?、電力、通訊等修建,增加修建抗震能力,下降設(shè)備損壞的可能性。然后削減人員傷亡或財(cái)產(chǎn)損失。然后替代了一般支架。1、節(jié)約 。

天津呼吸用復(fù)合氣瓶檢測(cè)費(fèi)用是多少
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第8樓
影響 等 22 人贊同該回答

影響空呼使用時(shí)間的因素很多,包括氣瓶容量、充氣壓力、作業(yè)強(qiáng)度、呼吸習(xí)慣等,說(shuō)來(lái)這也是有學(xué)問(wèn)的。我們先從了解空氣呼吸器的工作原理談起??諝夂粑骺筛鶕?jù)使用者的呼吸量自動(dòng)調(diào)整供氣量,呼吸空氣從氣瓶出發(fā),經(jīng) 。

湖北壓縮式柜鎖哪種好
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第9樓
工業(yè) 等 57 人贊同該回答

工業(yè)電柜門(mén)鎖是電氣設(shè)備中重要的一部分,它的主要作用是確保電柜內(nèi)的設(shè)備的安全,防止未經(jīng)授權(quán)的訪問(wèn)和意外觸電。工業(yè)電柜門(mén)鎖通常都配有機(jī)械和電子兩種開(kāi)啟方式。機(jī)械門(mén)鎖需要使用鑰匙進(jìn)行開(kāi)啟,而電子門(mén)鎖則可以通 。

寧波U牌護(hù)膚品怎么樣
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第10樓
安心 等 48 人贊同該回答

安心守護(hù),致力陪伴——記U牌創(chuàng)始人豐小為2014年,在化妝品行業(yè)風(fēng)起云涌的時(shí)代,豐小為成立了U牌護(hù)膚品。作為一名的護(hù)膚品研發(fā)人員,豐小為深知產(chǎn)品質(zhì)量的重要性。他堅(jiān)持以誠(chéng)意與負(fù)責(zé)的態(tài)度,為消費(fèi)者提供安全 。

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